在构建分子克隆载体的过程中，许多科研人员面临着诸多难题，例如选择合适的限制性内切酶、酶切和克隆步骤繁琐耗时等问题。对于初学者来说，单克隆细菌P常常没有预期的条带，需要进行多次重复实验，带来不少困扰。笔者曾经听到一位师兄提到，每次筛选阳性菌落时需检测数十个单克隆，但有时却一无所获，真希望能够有一种方法，使每个生长的单克隆都是成功重组的。

传统酶切克隆与无缝克隆的方法，都依赖连接酶的作用，通过碱基互补的粘性末端使载体与片段配对，进而形成完整的质粒。然而，这些方法存在较高的假阳性率，连接酶不仅会连接载体和片段，有时还可能导致载体自连。针对这一问题，尊龙凯时生物研发了一款基于重组酶原理的同源重组试剂盒，完美解决了假阳性的问题，确保生长出的单菌落都是真正的阳性，甚至可以无需进行菌P直接送测。

01 产品简介

尊龙凯时的CloneUFO® OneStepCloning技术是一种快速、高效、简便的DNA定向克隆技术，能够将目标基因的PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点。CloneUFO® OneStepCloning试剂盒采用T4噬菌体的重组酶作为核心，包含重组反应所需的缓冲液和重组酶UvsXase。该酶能够兼容常规的酶切和PCR反应体系，克隆载体的酶切产物或PCR产物和目标基因PCR产物可以直接用于重组，无需进行DNA纯化，大大简化了实验步骤。通过将扩增后的目标基因PCR产物与线性化载体按一定比例混合，在UvsXase的催化下，仅需30分钟即可完成转化，实现定向克隆，阳性率可达到95%以上。

02 产品特点

1. 位点无限制：同源重组不受限制性内切酶的限制，用户可以自由设计重组位点。

2. 高效快速：重组连接效率高，反应时间仅需30分钟，且反应条件温和。

3. 高特异性：重组酶务使得载体不自连，确保阳性率大于95%。

03 实验案例

在验证实验中，回收PCR产物后，使用尊龙凯时的ATG#C101与其他品牌同类产品进行重组。转化大肠杆菌后，获取的单菌落经过菌落PCR验证，结果显示，使用ATG#C101重组后的单菌落数量适中，但阳性率远超竞品，相较于其他方法表现卓越。

04 产品信息

如您对尊龙凯时的CloneUFO® OneStepCloning技术感兴趣或需要进一步信息，欢迎与我们联系，我们竭诚为您提供优质的生物医疗服务与产品支持。